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质粒载体有什么功效

质粒载体有什么功效(图1)

载体条件: ① 分子量小,携带外源DNA片段进入受体细胞; ② 复制子,能独立于染色体进行自主复制; ③ 多克隆位点(MCS); ④ 标记基因,便于选择; ⑤ 拷贝数高,易于分离; ⑥ 安全。

λDNA的特点 ① ?噬菌体为温和噬菌体。② ?DNA为双链线性DNA,长度为48502 bp,具有多种限制酶的识别序列,便于外源DNA片段的插入和置换. ③两端有cos位点,可以环化。cos位点(cohensive-end site): ?DNA两端各有12bp的粘性末端,粘性末端形成的双链区域称为cos位点。λ噬菌体基因组特点 ?DNA上有66个基因,有一半是必需的,与自身的活动有关;其他约1/3是非必需基因。λ噬菌体载体的优点 比一般质粒载体容量大的多,可达20kb; 体外包装反应效力高,通常比质粒载体克隆效率 高100倍,适于构建cDNA文库和真核生物基因组文库

特点:可转移,并且可以携带目的基因与宿主生物的染色体基因整合。ti质粒是在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种核区DNA外的自主复制的环形双链DNA分子。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。

pMD?19-T Vector是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由pUC19载体改建而成,在pUC19载体的多克隆位点处的Xba I和Sal I识别位点之间插入了EcoR V识别位点,用EcoR V进行酶切反应后,再在两侧的3’端添加“T”而成。

因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’末端添加一个“A”的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。

由于本载体以pUC19载体为基础构建而成,所以它具有同pUC19载体相同的功能。此外,本制品中的高效连接液Solution I可以在短时间内(约30分钟)完成连接反应,其连接液可以直接用于细菌转化,大大方便了实验操作。本制品中的Control insert(500 bp)还可以用于Control反应。

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