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薄层板点样点后，经展开剂展开，在原点的样品随展开剂展开的过程斑点会逐渐变大，如果点样的斑点过大，经展开剂展开后斑点将变得更大，斑点变大后极性相近的物质无法达到完全分离，导致薄层层析失败。 在进行薄层实验时，点板的环节很重要，关乎到实验的成败，所以点板时一定有耐心，用力要轻，少量多次，待前面点的样品溶剂挥干后再点第二次，斑点的直径最好控制在3mm内。
聚酰胺分子中既有亲水基团又有亲脂基团，当用极性溶剂（如含水溶剂）作为流动相时，聚酰胺中的烷基作为非极性固定相，其色谱行为类似于反相分配色谱，因黄酮苷的极性大于苷元，所以黄酮苷比苷元容易洗脱；当用非极性流动相（如氯仿—甲醇）时，聚酰胺则作为极性固定相，其色谱行为类似于正相分配色谱。黄酮苷元的极性小于黄酮苷，因而黄酮苷元易被洗脱。此即是聚酰胺色谱的双重层析原理。
聚酰胺对极性物质的吸附作用，是由于它能和被分离物之间形成氢键所致。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间的吸附能力的大小。
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